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細(xì)胞周期的分析

日期:2021-08-11瀏覽:8245次

       細(xì)胞周期(cell cycle)是指細(xì)胞從一次分裂完成開(kāi)始到下一次分裂結(jié)束所經(jīng)歷的全過(guò)程,分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G2期)。細(xì)胞分裂期又稱(chēng)M期。細(xì)胞通過(guò)M期一分為二,有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán),有的轉(zhuǎn)入G0期。G0期是脫離細(xì)胞周期暫時(shí)停止分裂的一個(gè)階段。但在一定適宜刺激下,又可進(jìn)入周期(圖1),合成DNA與分裂。G0期的特點(diǎn)為:在未受刺激的G0細(xì)胞,DNA合成與細(xì)胞分裂的潛力仍然存在;當(dāng)G0細(xì)胞受到刺激而增殖時(shí),又能合成DNA和進(jìn)行細(xì)胞分裂。根據(jù)各個(gè)期細(xì)胞DNA的含量將細(xì)胞周期用G0/G1期、S期和G2/M期來(lái)表示,通過(guò)核酸染料標(biāo)記,并由流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析,可以得到細(xì)胞各個(gè)時(shí)期的分別狀態(tài),計(jì)算出G0/G1期、S期和G2/M期細(xì)胞的比例,了解細(xì)胞的周期分布及細(xì)胞的增殖活性。當(dāng)然,也可以通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞周期蛋白對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行精確的分期,但常用的檢測(cè)方法還是利用流式細(xì)胞儀進(jìn)行分析。細(xì)胞周期分析常用于腫瘤的早期診斷、腫瘤的良惡性判斷、觀察細(xì)胞的增殖狀態(tài)及周期分布和抗腫瘤治療的療效監(jiān)測(cè)等。

      在進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布的時(shí)候,應(yīng)注意以下幾點(diǎn):首先,消化細(xì)胞的時(shí)候,胰酶消化的時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),防止對(duì)細(xì)胞膜的損傷。其次,細(xì)胞樣品的采集要保證足夠的細(xì)胞濃度,以大于106為宜。第三,細(xì)胞固定時(shí),75%乙醇溶液固定效果較好,且固定時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),固定后的細(xì)胞盡量隨即上機(jī)檢測(cè),4℃保存時(shí)間不要過(guò)長(zhǎng)。提前計(jì)劃好實(shí)驗(yàn),提前預(yù)約流式細(xì)胞儀的使用時(shí)間


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